Proline được sử dụng trong nghiên cứu sinh hóa và dinh dưỡng, thử nghiệm vi sinh, môi trường nuôi cấy, chất bổ sung chế độ ăn uống, thuốc thử phòng thí nghiệm. Có sẵn trên thị trường dưới dạng L (-) - proline.
Sử dụng trong y tế: dinh dưỡng qua đường tiêm, ... nguyên liệu ban đầu cho captopril và enalapril.